生物安全柜的使用及維護
(一) 準備工作
1.在開始工作以前，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。
2.將所有必需的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進出前面開口的次數(shù)。物品放置要注意以下幾點：
①II級生物安全柜臺面前面和后面的進氣格柵不能被物品阻擋。
②所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中不會阻擋后部格柵。
③可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(如：混勻器、離心機等)應(yīng)靠近安全柜的后部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。
④潔凈的物品應(yīng)放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少15 cm外，降低交叉污染的可能性。
⑤容易受紫外線損傷的實驗樣本可以在紫外線殺菌后的實驗之前放入。
⑥不要在工作區(qū)內(nèi)排放過多的物品。
3.關(guān)閉操作前窗，打開生物安全柜的紫外燈，對生物安全柜工作臺面，側(cè)壁表面以及后壁內(nèi)側(cè)進行殺菌處理。
4.稍微打開操作前窗，讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作。
(二) 操作注意事項
1.在使用生物安全柜時應(yīng)穿著個體防護服并戴手套防止被污染。在進行一級和二級生物安全水平的操作時，可穿著普通實驗服。手套應(yīng)套在實驗服袖口外面。有些操作可能還需要戴口罩和護目鏡。
2.在生物安全柜內(nèi)，避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會對氣流產(chǎn)生影響，并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時，也易造成危險。在對接種環(huán)進行滅菌時，可以使用紅外線電加熱器,或者干脆使用一次性塑料接種環(huán)。
3.手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min,以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進行處理。
4.工作時，盡量減少手臂的移動，移動時要緩慢，防止干擾柜內(nèi)氣流。在移動雙臂進出安全柜時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該與工作區(qū)開口垂直地緩慢進出前面的開口。
5.在工作臺面上的實驗操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行，所有操作在工作臺面的中后部進行。
6.工作時，耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤放在安全柜內(nèi)不能拿出安全柜，否則在使用這些物品時雙臂就頻繁進出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護。
7.一旦實驗過程中產(chǎn)生溢灑物，用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
8.盡量使安全柜處于持續(xù)工作狀態(tài)，并對所有物品進行表面消毒處理，提供大程度的人員保護。從安全柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時，要進行表面消毒處理。
(三)使用完畢后的處理
1.系緊用過的生物廢物袋。
2.對安全柜內(nèi)壁、后壁、工作臺面和前窗內(nèi)側(cè)進行清潔和消毒處理。
3.由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結(jié)束時，包括儀器設(shè)備在內(nèi)的所有物品都應(yīng)清除表面污染，并移出安全柜。
4.從安全柜內(nèi)移出手臂之前，要進行表面消毒處理，然后垂直于工作區(qū)開口緩慢地移出。
6.在每次使用后，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑進行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物。在每天實驗結(jié)束時，應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來清除表面的污染。在對目標生物體有效時，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還用無菌水再次進行擦拭。
7.關(guān)閉前操作窗口并開啟紫外燈。
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