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氮?dú)獯祾邇x農(nóng)藥殘留檢測(cè)的技術(shù)研究

(GC/MIP/AED)方法用于水果、蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)yao殘留分析已在HP5921A系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)?，F(xiàn)在幾乎所有GC技術(shù)都采用內(nèi)涂有非極性或中等極性固定相的毛細(xì)管柱。毛細(xì)管柱在分辨能力、靈敏度、分析速度以及色譜柱的相對(duì)惰性方面均比填充柱*,還可以得到較好的分離效果。毛細(xì)管氣相色譜在農(nóng)yao殘留分析中的應(yīng)用始于上世紀(jì)70年代。1983年,有公司出了530μm內(nèi)徑彈性石英毛細(xì)管柱(被稱為大口徑柱),大口徑毛細(xì)管柱有較高的總柱效、理想的表面惰性、接近于填充柱的負(fù)荷量、較長(zhǎng)的壽命和較快的分析速度,并可用標(biāo)準(zhǔn)微升注射針作柱上進(jìn)樣。氮?dú)獯祾邇x近年來(lái),美國(guó)環(huán)保局(EPA)已將530μm柱引入其新制定的標(biāo)準(zhǔn)中。

3.1.2氣相色譜2質(zhì)譜聯(lián)用法(GC2MS)氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)日臻成熟,氮?dú)獯祾邇x現(xiàn)已廣泛用于果蔬樣品分析。采用SIM/GC/MS對(duì)果蔬中48種農(nóng)yao進(jìn)行多殘留分析,實(shí)現(xiàn)了同時(shí)定性和定量。目前,氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已被納入國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),比如GB/T1964822006氮?dú)獯祾邇x《水果和蔬菜中500種農(nóng)yao及相關(guān)化學(xué)品殘留的測(cè)定氣相色譜—質(zhì)譜法》,檢測(cè)組分高達(dá)500種。3.2液相色譜技術(shù)3.2.1高效液相色譜法(HPLC)HPLC也是一種傳統(tǒng)檢測(cè)方法,對(duì)于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子質(zhì)量大的農(nóng)yao原則上都可采用該方法。近10年來(lái),采用液相色譜法進(jìn)行殘留農(nóng)yao分析普遍,但氮?dú)獯祾邇x進(jìn)行復(fù)雜樣品多殘留分析時(shí)HPLC還受到限制。大部分HPLC方法采用以鍵合硅膠C18、C8為主的反相色譜模式,但近年來(lái)也有采用微型色譜柱。

與GC相比,HPLC的流動(dòng)相參與分離機(jī)制,其組成、比例和pH值可以靈活調(diào)節(jié),更有利于樣品的分析。HPLC同時(shí)檢測(cè)白菜中4種殘留農(nóng)yao的方法。3.2.2液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法(LC/MS/MS)液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用為農(nóng)yao殘留檢測(cè)提供了強(qiáng)有力的分析手段,可以對(duì)極性農(nóng)yao進(jìn)行有效分離、定性和定量分析,無(wú)需衍生化,因此是農(nóng)yao分析中非常有吸引力的分析手段。龐國(guó)芳等建立的多殘留方法采用LC/MS/MS技術(shù),可同時(shí)分析測(cè)定多達(dá)數(shù)十種不適于GC分析的農(nóng)yao。我國(guó)新近頒布實(shí)施的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T2076922006《水果和蔬菜中405種農(nóng)yao及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法》,檢測(cè)參數(shù)更達(dá)到405種。

3.3超臨界流體色譜(FC)SFC以超臨界流體(通常是CO2)為流動(dòng)相;對(duì)操作人員和環(huán)境無(wú)害,保留時(shí)間較短,工作溫度較低;適于分析中等極性、熱不穩(wěn)定性化合物;能與大多數(shù)液相色譜儀和氣相色譜儀聯(lián)用。氮?dú)獯祾邇x可通過(guò)改變溫度、壓力和流動(dòng)相組成改進(jìn)分離效率。結(jié)合使用SFE,可進(jìn)一步節(jié)省分析時(shí)間,提高分析準(zhǔn)確性。由于儀器昂貴,而且本身還存在一些問(wèn)題,目前SFC在農(nóng)yao殘留檢測(cè)中的應(yīng)用還不是太多。

3.4生物檢測(cè)技術(shù)3.4.1免疫分析(IA)免疫分析技術(shù)是基于將目標(biāo)待測(cè)物或其衍生物與抗體結(jié)合的一種檢測(cè)技術(shù),具有靈敏度高、成本低、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),成為傳統(tǒng)方法的重要補(bǔ)充。在農(nóng)yao殘留分析中,使用多的免疫分析技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。Nunes等使用該方法測(cè)定了水果和蔬菜中的甲萘威,該方法可以與LC二極管陣列檢測(cè)器(DAD)方法相當(dāng)。Brandon等可用單克隆抗體ELISA檢測(cè)番茄和蘋(píng)果中的噻菌靈,檢出限小于0.2mg/kg。

3.4.2生物傳感器(BS)生物傳感器的基本原理是將生物敏感元件發(fā)生的特異性反應(yīng)及信號(hào)經(jīng)由物理元件轉(zhuǎn)變?yōu)楣?、電、聲等易檢測(cè)信號(hào),從而間接獲知待測(cè)物的有關(guān)信息。Albareda2Sirvent等用戊二醛交聯(lián)法將乙酰膽堿酯酶固定在銅絲碳糊電極表面制成傳感器,可檢測(cè)10-10mol/L的對(duì)氧磷和10-11mol/L的*百威;檢測(cè)加標(biāo)的自來(lái)水和果汁,回收率接近100。近年來(lái),檢測(cè)農(nóng)yao殘留的生物傳感器研究取得長(zhǎng)足進(jìn)步,測(cè)定方法多樣化,靈敏度和儀器自動(dòng)化程度不斷提高,響應(yīng)時(shí)間縮短,適應(yīng)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)能力越來(lái)越強(qiáng)。

3.4.3活體檢測(cè)(bio2assay)活體檢測(cè)法是使用活的生物直接測(cè)定,如農(nóng)yao與細(xì)菌作用后可影響細(xì)菌的發(fā)光程度。通過(guò)細(xì)菌發(fā)光情況,可測(cè)出農(nóng)yao殘留量。該法過(guò)程簡(jiǎn)單、無(wú)需復(fù)雜儀器、農(nóng)戶便可自行檢測(cè),但只對(duì)少數(shù)藥劑有反應(yīng),無(wú)法辨別殘留農(nóng)yao的種類,準(zhǔn)確性較低,檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng),僅適用于田間未采收的水果和蔬菜。

4水果和蔬菜中農(nóng)yao殘留快速檢測(cè)技術(shù)4.1乙酰膽堿酯酶?jìng)鞲衅髟撍贆z技術(shù)可以快速檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯等兩類農(nóng)yao超標(biāo)較為嚴(yán)重的水果和蔬菜。該方法具有檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)大量樣本、檢測(cè)成本低、對(duì)于檢測(cè)人員技術(shù)水平要求低、易于推廣等特點(diǎn)。是目前我國(guó)控制高毒農(nóng)yao殘留的一種有效的方法，也是目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用為廣泛的農(nóng)yao殘留快速檢測(cè)方法。但該農(nóng)yao殘留快速檢測(cè)方法原理上于膽堿酯酶的功能被抑因而其檢測(cè)農(nóng)yao種類只限于有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao,不能給出定性定量檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)限普遍高于國(guó)際和國(guó)內(nèi)規(guī)定的殘留*值，因此不能作為法律仲裁依據(jù)氮?dú)獯祾邇x比色法利用此方法對(duì)蔬菜、果品及農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行農(nóng)yao殘留測(cè)定,靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、檢驗(yàn)速度快、可檢測(cè)多種農(nóng)yao的綜合殘留量。但是，目前不少酶液比色法是把樣品切碎制成提取液，再用分廣光度計(jì)比色檢測(cè)，從直觀上看這樣可檢出供測(cè)樣品的表面以及組織內(nèi)的農(nóng)yao殘留。但實(shí)際上，由于植物組織液中的一些成分會(huì)與顯色劑反應(yīng)等原因。往往會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。4.3殘毒速測(cè)箱速測(cè)箱具有以下特點(diǎn)：快速（每樣需要15-20min）、簡(jiǎn)便、容易使用、不需要貴重設(shè)備和專門(mén)技術(shù)人員、成本低（每樣需要用0.50元）適用于田間篩選大量樣品且所用的酶片和顯色基質(zhì)片在常溫下、干燥條件下能保存2年以上。

5結(jié)束語(yǔ)隨著人們對(duì)食品安全意識(shí)的不斷提高，水果和蔬菜的農(nóng)yao殘留檢測(cè)技術(shù)必然會(huì)引起更廣泛的研究。生物技術(shù)應(yīng)用于水果和蔬菜農(nóng)yao殘留的分析，并與現(xiàn)代化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合，將是今后該領(lǐng)域研究的重點(diǎn)，此技術(shù)的應(yīng)用必會(huì)對(duì)農(nóng)yao殘留的檢測(cè)技術(shù)達(dá)到一個(gè)新的水平。