如何實(shí)現(xiàn)二氧化碳濃度的控制
二氧化碳培養(yǎng)箱常用熱導(dǎo)(TC)傳感器或紅外(IR)傳感器檢測(cè)箱體內(nèi)二氧化碳濃度的變化。當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開時(shí),CO2從箱體內(nèi)漏出,此時(shí)傳感器就會(huì)探測(cè)到CO2濃度的降低,并做出及時(shí)的反應(yīng),重新注入CO2使其恢復(fù)到原先預(yù)設(shè)的水平。
(1)熱導(dǎo)(TC)傳感器 熱傳導(dǎo)傳感器(TC)監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過測(cè)量?jī)蓚€(gè)電熱調(diào)節(jié)器之間的電阻變化來實(shí)現(xiàn)的。箱內(nèi)CO2濃度的變化會(huì)改變兩個(gè)電熱調(diào)節(jié)器間的電阻,輸入CO2氣體的低熱導(dǎo)率會(huì)使腔內(nèi)空氣的熱導(dǎo)率發(fā)生變化,這樣就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)與CO2濃度直接成正比的電信號(hào)。從而促使傳感器產(chǎn)生反應(yīng)以達(dá)到調(diào)節(jié)CO2水平的作用。 TC控制系統(tǒng)存在的缺點(diǎn):1.TC控制系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生漂移。2.重新校準(zhǔn)的周期較長(zhǎng)。3.箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改變會(huì)影響傳感器的度。當(dāng)箱門被頻繁打開時(shí),不僅CO2濃度,溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)生很大的波動(dòng),因而影響了TC傳感器的精度。當(dāng)需要的培養(yǎng)條件和頻繁開啟培養(yǎng)箱門時(shí),此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。
(2)紅外(IR)傳感器 紅外傳感器(IR)系統(tǒng)包括一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)接收檢測(cè)器,當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,接收檢測(cè)器就可以檢測(cè)出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對(duì)應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。IR系統(tǒng)相比TC系統(tǒng),穩(wěn)定性更高,檢測(cè)結(jié)果無漂移,重新校準(zhǔn)更快,因而價(jià)格也會(huì)有所上升。當(dāng)前市場(chǎng)上出售的二氧化碳培養(yǎng)箱常規(guī)配置的是TC系統(tǒng),當(dāng)然也有一些生產(chǎn)制造商更為注重CO2的濃度控制,出廠的所有二氧化碳培養(yǎng)箱均標(biāo)配IR系統(tǒng)。
但是也并不是所有的CO2濃度紅外傳感器的工作原理都是一樣的,基于非發(fā)散性紅外線氣體檢測(cè)原理的測(cè)量方法主要有3種:?jiǎn)喂馐鴨尾ㄩL(zhǎng)測(cè)量、雙光束雙波長(zhǎng)測(cè)量和單光束雙波長(zhǎng)測(cè)量。 單光束單波長(zhǎng)測(cè)量,顧名思義,這種CO2傳感器只能提供單一波長(zhǎng)的光線,由于其穩(wěn)定性易受到諸如燈泡老化、灰塵污染、溫度變化及光線發(fā)射特性變化等因素的影響,因而其測(cè)量的穩(wěn)定性和精度都不夠準(zhǔn)確。 雙光束雙波長(zhǎng)測(cè)量,這種測(cè)量?jī)x器備有2個(gè)光波通道,1個(gè)探測(cè)器和2個(gè)濾光鏡,與單光束單波長(zhǎng)測(cè)的儀器比較,其精度和穩(wěn)定性都有所提高,但在實(shí)際應(yīng)用中,2個(gè)光波通道受到的影響程度同樣也會(huì)給這類測(cè)量?jī)x器帶來因非對(duì)稱影響而精度失準(zhǔn)的問題。 單光束雙波長(zhǎng)測(cè)量,保證了二氧化碳濃度控制的高精度性,避免了雙光束衰減干擾不同步引起的誤差,也避免了單光束單波長(zhǎng)探頭的不穩(wěn)定性,好的保護(hù)了寶貴的培養(yǎng)材料。
如何實(shí)現(xiàn)溫度的控制
維持培養(yǎng)細(xì)胞旺盛生長(zhǎng),有恒定而適宜的溫度。不同種類的細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)溫度要求也不同,例如魚、昆蟲和兩棲類細(xì)胞的適宜培養(yǎng)溫度是25-28℃,哺乳動(dòng)物細(xì)胞的適宜培養(yǎng)溫度是35-37℃,發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞則適合在高于40℃的條件下生長(zhǎng)。人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細(xì)胞的正常代謝會(huì)受到影響,甚至死亡。保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細(xì)胞健康生長(zhǎng)重要因素。CO2培養(yǎng)箱的溫度是通過電熱絲加熱的, 主要有水套式加熱和氣套式加熱兩種加熱系統(tǒng)。
(1)水套式加熱 水套式加熱是通過一個(gè)獨(dú)立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的,其優(yōu)點(diǎn):水是一種很好的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時(shí)候,水套式系統(tǒng)就可以比較長(zhǎng)時(shí)間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,有利于實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制或經(jīng)常停電)的用戶選用。
(2)氣套式加熱 氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對(duì)內(nèi)箱體進(jìn)行加熱的,又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn),有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)取放樣的培養(yǎng)。此外,對(duì)于使用者來說氣套式設(shè)計(jì)比水套式更簡(jiǎn)單化(水套式需要對(duì)水箱進(jìn)行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況,還有潛在的污染隱患)。
氣套式加熱優(yōu)點(diǎn)總結(jié):
1.重量更輕、運(yùn)輸或搬運(yùn)更方便;
2.加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速,有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)取放樣的培養(yǎng);
3.不會(huì)發(fā)生因?yàn)槁┧斐蓸悠肺廴荆?/span>
4.可選擇更多滅菌方式(水套利用水作為傳熱介質(zhì),高溫加熱滅菌困難)。 為了滿足低溫培養(yǎng)的需求,二氧化碳培養(yǎng)箱廠家勵(lì)精圖治開發(fā)出了內(nèi)置制冷系統(tǒng)的產(chǎn)品可供研究者選擇,
5如何滿足細(xì)胞培養(yǎng)濕度的要求 水是細(xì)胞的重要組成部分,在培養(yǎng)箱中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)過程里,制冷或者制熱直接的影響是細(xì)胞的培養(yǎng)基快速蒸發(fā)失水,蒸發(fā)將導(dǎo)致培養(yǎng)基上的滲透作用增強(qiáng),產(chǎn)生滲透性脫水;培養(yǎng)基中鹽濃度增加,細(xì)胞中水分跑出細(xì)胞外細(xì)胞收縮,新陳代謝變緩,細(xì)胞死亡。 培養(yǎng)箱內(nèi)相對(duì)濕度的控制室重要的,飽和濕度環(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,保持pH值穩(wěn)定,也能防止由于干燥使培養(yǎng)液中水分蒸發(fā),滲透壓升高,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗。大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的,大型的二氧化碳培養(yǎng)箱是用蒸汽發(fā)生器或噴霧器來控制相對(duì)濕度水平的。一些培養(yǎng)箱在底部設(shè)置濕度蓄水池,這樣可以增強(qiáng)蒸發(fā)作用,但是,這個(gè)系統(tǒng)也更復(fù)雜,由于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的增加一些難以預(yù)料的問題也會(huì)在使用過程中出現(xiàn)。
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